西南大学培训与继续教育学院课程考试试题卷课程名称【编号】：生物技术制药概论【1138】 A 卷 考试类别:大作业 满分：100 分满分 100 分，每题 50 分，学生从以下题目中选做 2 题。1. 举例说明重组蛋白和多肽药物的主要差异。2. 简述单克隆抗体的制备过程。（1）首先分次用特异抗原免疫实验动物(小鼠)，使其脾内产生大量处于活跃增殖状态的特异 B 细胞；同时体外培育鼠骨髓瘤细胞。（2）杀鼠取脾制得含大量 B 细胞的脾细胞后，将鼠骨髓瘤细胞和脾细胞以聚乙二醇(PEG)法进行细胞融合。（3）从获得的杂合细胞中选出能产生特定抗体的克隆，培养出既有肿瘤细胞迅速生长繁殖特性，又具有 B 淋巴细胞分泌特异抗体能力的杂交瘤。（4）获得较稳定的单克隆杂交瘤细胞后，可将它们注射入哺乳物 (小鼠)腹腔，然后从腹水中分离、提取单克隆抗体；或者将它们移到培养瓶或生物反应器中培养，再从培养液中回收产生的抗体。3. 介绍重组阳性克隆子的筛选和鉴定方法。（1）根据重组子遗传重组表型改变的筛选法① 利用抗生素抗性基因进行筛选② 通过 α 互补使菌产生颜色来筛选③ 利用报告基因筛选克隆子（2）根据重组子结构特征的筛选法① 琼脂糖凝胶电泳比较重组 DNA 的大小② 限制性内切酶分析③ 印迹杂交方法④PCR 法（3）根据目的基因表达产物采用免疫化学方法筛选。4. 如何控制基因工程药物质量？基因工程药物的质量控制要点如下。1 蛋白质含量的测定。2 蛋白质纯度检测。3 蛋白质Mr 测定。4 蛋白质等电点测定。5 蛋白质序列分析。6 内毒素分析，宿主蛋白液和酸残留分析5.基因工程制药常见的三大表达系统各有哪些优缺点？ 　大肠杆菌表达体系酵母表达体系哺乳动物细胞表达体系优点遗传背景清晰、成本低廉、可选细胞生长快、易于培养、遗产物最接近于天然蛋- 1 - 载体及宿主多传操作简单、使用穿梭质粒载体、能对蛋白质进行正确加工、修饰、合理的空间折叠白、易纯化、扩增和表达能力高、耐较高的剪切力和渗透压力、内源蛋白分泌少缺点缺乏翻译后修饰加工，信号肽不能切掉，不能分泌表达、不能糖基化产物蛋白质不均一、信号肽加工不完全、内部降解、易形成多聚体技术要求高、生产成本高、生产规模小- 2 -